TGuide FFPE DNA enostopenjski komplet

Enostopenjska ekstrakcija DNK genoma iz vzorcev FFPE.

TGuide FFPE DNA One-Step Kit je posebej zasnovan za ekstrakcijo DNK genoma iz vzorcev parafinskega tkiva z avtomatiziranimi ekstraktorji nukleinske kisline TGuide. Ta komplet uporablja enostopenjsko metodo segrevanja, tako da se lahko hkrati izvedeta deparafinizacija in liza tkiva, škodljivi reagenti, kot je ksilen, pa ne vsebujejo. Ta komplet ima dve možnosti ekstrakcije: Za majhno količino vzorcev izberite 2 uri lize; Za veliko količino vzorcev izberite 16 ur liziranja čez noč. Komplet uporablja tehnologijo magnetnih kroglic, vgrajenih v celulozo, za učinkovito ekstrakcijo DNK genoma.

Mačka. Ne	Velikost pakiranja
OSR-M405	48 priprave

Pošljite nam e -pošto

Podrobnosti o izdelku

Eksperimentalni primer

Pogosta vprašanja

Oznake izdelkov

Aplikacije

Očiščeno DNA lahko neposredno uporabimo pri različnih običajnih operacijah, vključno z encimsko razgradnjo, PCR, gradnjo knjižnice, Southern blotom in drugimi poskusi.

Lastnosti

■ Deparafinizacija v stroju: Deparafinizacijo in ekstrakcijo lahko samodejno zaključite tako, da preprosto vstavite neobdelane parafinske vzorce v vložek za reagent in nato dodate Sula Oil in Proteinazo K.
■ Zanesljivi rezultati: Dobljena DNK genoma ni okužena z RNA in beljakovinami in se lahko neposredno uporabi za PCR ali fluorescenčno kvantitativno PCR.
■ Varno in neškodljivo: Organska topila, ki so škodljiva za človeško telo, kot je fenol kloroform, niso potrebna.

Vse izdelke je mogoče prilagoditi za ODM/OEM. Za podrobnosti,kliknite prilagojeno storitev (ODM/OEM)

Prejšnji: Komplet celic celice TGuide/tkivne genomske DNA

Naslednji: Komplet genomske DNK bakterije TGuide

Rezultati so pokazali, da so bili ekstrakti obeh metod pri velikih količinah primerljivi; pri vzorcih s srednjim in majhnim volumnom je bil izkoristek enostopenjske metode deparafinizacije (izveden s TGuide) večji kot pri običajni metodi deparafinizacije. Zato metoda deparafinizacije v enem koraku ne samo poenostavi delovanje, zmanjša tveganje, ampak tudi izboljša učinkovitost ekstrakcije.
Opomba:
Vzorec velike prostornine: površina prereza je znotraj 2,5-4 cm² debelina pa je znotraj 5-20 μm.
Vzorec srednje prostornine: površina preseka je znotraj 1,5-2,5 cm² debelina pa je znotraj 5-20 μm.
Vzorec majhne prostornine: površina preseka je znotraj 0,2-1,5 cm² debelina pa je znotraj 5-20 μm.

V: Malo ali nič DNK v eluentu.

A-1 Nizka koncentracija celic ali virusa v začetnem vzorcu-obogatite koncentracijo celic ali virusov.

A-2 Nezadostna liza vzorcev-Vzorcev niso dobro premešali z liznim pufrom. Priporočljivo je, da 1-2-krat temeljito premešate s pulznim vrtinčenjem. —Nezadostna celična liza zaradi zmanjšanja aktivnosti proteinaze K. —Nezadostna celična liza ali razgradnja beljakovin zaradi nezadostnega časa tople kopeli. Predlagamo, da tkivo razrežemo na majhne koščke in podaljšamo čas kopeli, da odstranimo vse ostanke v lizatu.

A-3 Nezadostna adsorpcija DNA. -Pred prenosom lizata v centrifugirano kolono ni bilo dodanega etanola ali nizkega odstotka namesto 100% etanola.

A-4 pH vrednost elucijskega pufra je prenizka. -Prilagodite pH med 8,0-8,3.

V: DNK se v poskusih encimskih reakcij na spodnji stopnji ne obnese dobro.

Preostali etanol v eluentu.

—V eluentu je preostali pufer za pranje PW. Etanol lahko odstranimo s centrifugiranjem centrifugirane kolone 3-5 minut, nato pa postavimo na sobno temperaturo ali 50 ℃ inkubator za 1-2 min.

V: Razgradnja DNK

A-1 Vzorec ni svež. - Kot kontrolo izvlecite pozitivno vzorčno DNK, da ugotovite, ali se je DNK v vzorcu razgradila.

A-2 Nepravilna predhodna obdelava. —Vzrok za prekomerno mletje tekočega dušika, ponovno pridobivanje vlage ali preveliko količino vzorca.

V: Kako opraviti predhodno obdelavo za ekstrakcijo gDNA?

Predhodne obdelave se morajo za različne vzorce razlikovati. Za vzorce rastlin temeljito zmeljite v tekočem dušiku. Za vzorce živali homogenirajte ali temeljito zmeljite v tekočem dušiku. Za vzorce s celičnimi stenami, ki jih je težko zlomiti, na primer bakterije G+ in kvas, se predlaga uporaba lizocima, litikaze ali mehanskih metod za razbijanje celičnih sten.

V: Kakšna je razlika med tremi kompleti za ekstrakcijo gDNA rastlin 4992201/4992202, 4992724/4992725, 4992709/4992710?

4992201/4992202 Komplet rastlinske genomske DNA uporablja metodo na osnovi kolone, ki za ekstrakcijo zahteva kloroform. Še posebej je primeren za različne vzorce rastlin, pa tudi za rastlinski suh prah. Hi-DNAsecure Plant Kit temelji tudi na kolonah, vendar ne potrebuje ekstrakcije fenola/kloroforma, zaradi česar je varen in netoksičen. Primeren je za rastline z visoko vsebnostjo polisaharidov in polifenolov. 4992709/4992710 DNAquick Plant System sprejema metodo na osnovi tekočine. Tudi ekstrakcija fenola/kloroforma ni potrebna. Postopek čiščenja je preprost in hiter, brez omejitev za začetne količine vzorca, zato lahko uporabniki količino prilagodljivo prilagodijo glede na eksperimentalne zahteve. Velike velikosti fragmentov gDNA je mogoče dobiti z visokim izkoristkom.

Kolikšen je ocenjeni donos gDNA iz 1 ml krvnega vzorca s TIANamp Blood DNA Kit?

Genomsko DNA smo ekstrahirali iz različnih količin vzorcev polne krvi človeka s kompletom TIANamp Blood DNA Kit. Rezultati so naslednji. Rezultati so navedeni le kot referenčni, dejanski rezultati ekstrakcije so odvisni od pogojev vzorcev.

V: Ali je mogoče 4992207/4992208 in 4992722/4992723 uporabiti za pridobivanje DNK krvnih strdkov?

Ekstrakcijo DNK krvnega strdka lahko izvedemo z reagenti iz teh dveh kompletov, tako da preprosto spremenimo protokol v posebno navodilo za ekstrakcijo DNK krvnega strdka. Mehko kopijo protokola ekstrakcije DNK krvnega strdka lahko izdate na zahtevo.

V: Kako pri uporabi kompleta genomske DNA TIANamp razbiti sveža tkiva v celično suspenzijo?

Svež vzorec suspendiramo z 1 ml PBS, običajne fiziološke raztopine ali pufra TE. Vzorec popolnoma homogeniziramo s homogenizatorjem in oborino zberemo na dno epruvete s centrifugiranjem. Odstranite supernatant in oborite suspenzijo z 200 μl pufra GA. V skladu z navodili lahko izvedemo naslednje čiščenje DNK.

V: Kako izbrati izdelek za ekstrakcijo DNK iz vzorcev plazme, seruma in telesnih tekočin?

Za čiščenje gDNA v vzorcih plazme, seruma in telesnih tekočin je priporočljiv komplet mikro DNA TIANamp. Za čiščenje gDNA virusa iz vzorcev seruma/plazme se priporoča TIANamp Virus DNA/RNA Kit. Za čiščenje bakterijske gDNA iz vzorcev seruma in plazme se priporoča TIANamp Bacteria DNA Kit (za pozitivne bakterije je treba vključiti lizocim). Za vzorce sline sta priporočljiva komplet DNK hi-brisa in komplet DNK bakterij TIANamp.

V: Kako izbrati komplete za ekstrakcijo gDNA iz vzorcev gliv?

Za ekstrakcijo genoma gliv se priporoča DNAsecure Plant Kit ali DNAquick Plant System. Za ekstrakcijo genoma kvasa se priporoča komplet DNK kvasa TIANamp (litikazo je treba pripraviti samostojno).

Komplet za ekstrakcijo DNK brez celic